核酸提取是指将核酸（DNA和RNA）从细胞中提取出来的历程 ，，，，，总的来说包括细胞裂解、核酸纯化及后续核酸浓度、纯度测定的办法 。。。。。。。凭证原始样品的种类和核酸产品后续的种种应用目的 ，，，，，细胞裂解和核酸纯化办法有差别的处置惩罚要领和要求 。。。。。。。
一、实验室中的DNA提� 。。。。。。。�
案例一：小鼠基因型判断实验的模板DNA提取
初始样品为小鼠尾切段 。。。。。。。唬� ；；；；；；蛐团卸鲜笛槎訢NA模板的浓度、纯度要求不高 ，，，，，消化提取历程相对简朴 。。。。。。。
实验办法：
1.将1cm尾巴切段置于1.5mL微量离心管中 ，，，，，加入适量裂解液（Lysis buffer）和卵白酶（Proteinase K）于55~65℃水浴住宿消化 。。。。。。。
2.充分消化后的尾巴样品加入沉淀液（Precipitation buffer）后用旋涡混匀器来使杂质卵白充分沉淀 ，，，，，杂质沉淀后通过离心操作（如4℃ ，，，，，4000Xg ，，，，，5min） ，，，，，取出溶有目的DNA的上清液 ，，，，，扬弃杂质沉淀 。。。。。。。
3.上清液中加入100%异丙醇 ，，，，，小心倒置离心管30~40次 ，，，，，便可以将产品DNA沉降 。。。。。。。离心操作（4℃ ，，，，，10000Xg或12000rpm ，，，，，10min）去除上清 。。。。。。。
4.用75%乙醇洗涤两次DNA产品 ，，，，，待乙醇充分挥发后 ，，，，，用水或TE缓冲液（Tris-EDTA buffer）收获DNA模板产品 。。。。。。。
举行后续的PCR扩增实验前 ，，，，，可以使用Nanodrop仪器来举行DNA浓度和纯度的测定来提高PCR反应的乐成率 。。。。。。。在PCR扩增实验不顺遂的情形下 ，，，，，也可以进一步对DNA产品的完整度举行检测 ，，，，，详细要领可以参审核酸检测和核酸扩增的有关内容 。。。。。。。
案例二：用于重组的质粒DNA提取
用于重组的质粒对DNA产品的浓度、纯度和完整度都要求较高 ，，，，，不然无法乐成完成质粒酶切和酶连的办法 。。。。。。。
实验办法：
1.从含有住宿作育大肠杆菌的试管中取出适量菌液置于微量离心管中 ，，，，，低速离心（4000Xg ，，，，， 5min）处置惩罚后收获大肠杆菌 ，，，，，除去作育液 。。。。。。。
2.使用质粒提取试剂盒(Plasmid DNA extraction kit)提取大肠杆菌质粒 。。。。。。。原理菌体裂解后 ，，，，，加入中和液（Neutralization buffer）过微型柱 ，，，，，使DNA特异团结于柱上 ，，，，，而其他杂质会过柱洗脱 。。。。。。。最后用洗脱液(Elute buffer)洗下DNA即可获得质粒DNA产品 。。。。。。。
3.经试剂盒提取后的质粒DNA有时需要经电泳切胶接纳的操作将目的质粒DNA与其他DNA疏散 。。。。。。。切下的胶消化后经DNA纯化试剂盒纯化即可获得纯度较高的目的质粒DNA 。。。。。。。详细的内容可以参审核酸检测的有关内容 。。。。。。。
二、实验室中的RNA提取
[ RNA Extraction: Principle, Procedure, Protocol and Importance – Genetic Education]：
RNA提取历程与DNA类似 ，，，，，也是通过裂解细胞后通过有机溶剂（苯酚、氯仿、异戊醇）沉降杂质的要领来疏散RNA 。。。。。。。但RNA的稳固性比DNA低许多 ，，，，，因此对RNA提取对温度和污染扫除的要求更高 。。。。。。。实研操作一样平常从以下几个角度来提升乐成率：降低RNA水解酶活性、提升RNA稳固性、使RNA与DNA和卵白疏散、仅沉降RNA、有用去除DNA 。。。。。。。
案例一：总RNA提取
实验办法与DNA提取类似 ，，，，，但有机溶剂的使用会有所差别 。。。。。。。在首次离心后 ，，，，，混淆物会分为三层 ，，，，，RNA溶于上层无色水相 ，，，，，而DNA和卵白会处于中心层 ，，，，，组织残渣等杂质处于底层酚-氯仿相中2 。。。。。。。
实验办法：
1.向提取样品中加入裂解液（如Trizol） ，，，，，裂解细胞与组织 ，，，，，室温静置5-8分钟 。。。。。。。
2.加入氯仿 ，，，，，充分混匀后离心（4℃ ，，，，，12000rpm ，，，，，10min） ，，，，，取出上清液 。。。。。。。
3.向上清液中加入异丙醇沉降RNA ，，，，，并离心（4℃ ，，，，，12000rpm ，，，，，10min）弃去上清 。。。。。。。
4.用75%乙醇洗涤产品两次 ，，，，，待乙醇挥发后加入RNase-free水消融产品 。。。。。。。
实验中用到的yh533388银河(中国区)有限公司官方网站耗材和仪器：
枪头、微量离心管、（15、50mL）离心管、迷你旋涡疏散器（105003） 。。。。。。。
